【摘 要】
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鸡β-防御素(Gal3)是鸡体内最重要的防御因子,本文研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高水平表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.在加入诱导剂1h时,开始有可检出量的重
【机 构】
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山东信得药业有限责任公司,山东青岛
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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鸡β-防御素(Gal3)是鸡体内最重要的防御因子,本文研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高水平表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.在加入诱导剂1h时,开始有可检出量的重组蛋白质表达,在2h时其表达水平已接近最大量；化学诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在0.2-1.2mmol/ml范围内,对重组蛋白的产量没有明显影响。经LabImage软件分析,融合蛋白的产量可达菌体总蛋白的35％以上,且主要以包涵体形式存在。将所获包涵体用8mol/L尿素溶解后,分步稀释于含有氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽的复性系统中,重组蛋白得到完全复性。经复性的重组鸡Gal3在12μg/ml时,能抑制肠炎沙门氏菌的生长,在24μg/ml时可抑制肠致病型大肠杆菌的生长。
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