基于双模荧光试纸条快速灵敏检测碱性磷酸酶

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免疫层析试纸条技术是上世纪80年代初出现的一种新型免疫分析技术[1]。该技术是继放射免疫分析、荧光免疫分析、酶免疫分析之后,应用最为广泛的免疫分析技术。作为一种快检技术,免疫层析试纸条技术满足了作为一个生物传感器的所有要求:检测限低,灵敏度高,选择性好,样品需求量小,价格低廉,检测快速,使用简单。由于这些杰出的性能,免疫层析试纸条已广泛应用于人们日常生活的方方面面。近年来,随着纳米材料的快速发展应用,将纳米材料与与免疫层析技术结合为免疫分析的发展带来了新的活力。量子点作为一种优良的光学纳米材料,因其杰出的性质(尺寸可调,激发光谱很宽且发射光谱窄而对称,有较大的Stock’s位移,量子产率相对较高,抗光漂白能力强等)[2-3]已被广泛应用于免疫分析检测。基于免疫层析试纸条及量子点的优势,我们尝试以量子点的荧光信号和二氧化锰片层的比色信号的变化,双信号检测碱性磷酸酶。具体展开如下工作:首先,基于我们实验室以前的工作,成功得到荧光试纸条及二氧化锰片层。当样品中含有二氧化锰片层时,二氧化锰片层通过毛细涌动作用抵达检测线,在检测线上被吸附同时猝灭量子点的荧光,随着检测线上二氧化锰片层浓度的增加,出现棕色比色信号,以此同时,量子点的荧光信号减弱。当样品中含有碱性磷酸酶(ALP)时,ALP能够催化2-磷酸抗坏血酸酯(AAP)产生抗坏血酸(AA),AA能够很好地将二氧化锰片层还原成Mn2+,Mn2+无法猝灭量子点的荧光,基于此,我们能够通过量子点荧光信号及二氧化锰片层比色信号,成功实现对碱性磷酸酶的定量分析。在最佳实验条件下,ALP的检测线低至0.7μU·mL-1,检测时间仅为10分钟。本方法也成功应用于人血清样本ALP含量分析。与现有的ALP检测技术相比,本工作具有快速灵敏、操作简单、价格低廉且能够实现现场检测等的优点。
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