【摘 要】
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【研究目的】从菠萝中克隆AP2基因,在转录水平上探索其对乙烯利的响应情况,研究他们在乙烯利诱导菠萝成花过程中发挥的作用。【方法】从菠萝基因组数据库中获得AcAP2基因全长
【机 构】
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海南省农业科学院热带果树研究所海南省热带果树生物学重点实验室农业部海口热带果树科学观测实验站; 海南大学热带作物学院;
【基金项目】
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海南省科协青年科技英才学术创新计划项目(QCXM201803);国家自然科学基金项目(31260460);国家自然科学基金项目(31960589);海南省农业科学院农业科技创新专项
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【研究目的】从菠萝中克隆AP2基因,在转录水平上探索其对乙烯利的响应情况,研究他们在乙烯利诱导菠萝成花过程中发挥的作用。【方法】从菠萝基因组数据库中获得AcAP2基因全长序列,通过RT-PCR技术克隆AcAP2基因;借助多种生物信息学软件分析菠萝AP2基因及其蛋白信息;利用DNAman、MEGA6.0软件分别进行序列比对和进化树构建;通过qRT-PCR技术分析AP2基因在菠萝不同组织部位中对乙烯利的响应情况。【结果】克隆得到4个AP2家族基因,分别命名为AcAP2-1、AcAP2-2、AcAP2-3、AcAP2-4,开放阅读框大小分别为1353bp、1449bp、1368bp、1122bp,均具有典型的AP2结构域。系统进化树表明Ac AP2-1与油棕EgAP2-2、海枣PdAP2的遗传距离较近;AcAP2和AcAP3与蜻蜓凤梨AfAP2-1的遗传距离较近;AcAP2-4与油棕EgAP2-5的遗传距离较近。实时荧光定量PCR分析表明,叶片中4个AcAP基因整体呈现先下降后上升的表达趋势,分别在乙烯利处理后1d、6h、3h、1d表达量达到最高;茎尖中4个AcAP基因呈现先上升后下降的表达趋势,分别在6h、6h、6h、1d表达量达到最高。【结论】成功克隆了4个AcAP2家族基因,AcAP2-1、AcAP2-4与油棕的AP2成员在遗传距离上相近;AcAP2-2、AcAP2-3与蜻蜓凤梨的AP2成员在遗传距离上相近;乙烯利处理下这些基因均有不同程度的响应,说明他们可能参与响应外源乙烯利信号诱导菠萝成花。
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