FSH-occludin重组基因毕赤酵母表达载体的构建与鉴定

来源 :第六届全国生殖免疫学大会暨学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:llizhixiong
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目的:构建FSH与occludin重组基因的毕赤酵母分泌型表达载体,为生物学功能及临床应用研究奠定基础. 方法:利用RT-PCR技术,从小鼠新鲜脑组织中提取总RNA扩增获得FSH-β亚单位,同法从小鼠新鲜睾丸组织中提取总RNA扩增occludin,通过双重PCR扩增,可获得FSHβ-亚单位基因序列和闭锁因子第二个胞外环序列的耦合片段,构建重组质粒pPIC9KFSH-occludin. 结果:通过双酶切分析、PCR鉴定确定FSH-occludin基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPIC9K中. 结论:成功构建了含有目的基因序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPIC9KFSH-occludin质粒.
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