【摘 要】
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Flolp是来自于酿酒酵母,以其为锚定蛋白展示在酵母表面的脂肪酶具有良好的耐有机溶媒和催化性能,得到了广泛的应用.FFD是Flolp的N端絮凝结构域,本文通过重叠延伸PCR的方法改
【机 构】
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广东省广州番禺大学城华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室 510006
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Flolp是来自于酿酒酵母,以其为锚定蛋白展示在酵母表面的脂肪酶具有良好的耐有机溶媒和催化性能,得到了广泛的应用.FFD是Flolp的N端絮凝结构域,本文通过重叠延伸PCR的方法改造pKFS-EGFP质粒,获得FS重复序列区A区长度不同的突变质粒,然后转化毕赤酵母GS115获得重组型毕赤酵母.随后对各个重组毕赤酵母进行诱导发酵并比较不同长度重复序列区A区的突变株表达EGFP的荧光强度,从而探究不同的FS重复序列区A区的长度对展示效果的影响.研究结果发现FS的重复区A区的长度越长,展示的效果越好,所有删减的突变子的展示效果都比原来的重组菌的展示效果差,重复区长度减少的越多展示的效果越差.实验中展示的EGFP的总量随着FS重复区数目的减少而降低.上清中荧光强度的变化没有明显的规律,需设计进一步的实验进行研究.
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