本研究旨在建立一种操作简单且能获得大量细胞的猪脐静脉血管内皮细胞体外分离培养方法。采集新生健康长白猪脐带，分离出脐静脉血管，灌注0．1％的I型胶原酶于37℃水浴消化l0 min后收集细胞培养于含20％胎牛血清的M199培养基中。单层细胞用胰酶消化进行细胞传代。培养的细胞进行细胞形态学、第VIII因子相关抗原和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)摄取鉴定，并绘制生长曲线和感染猪瘟病毒(CSFV)。结果表明，I型胶原酶消化后可获得大量原代细胞培养物。细胞形态学观察显示所获得的细胞在体外培养时贴壁生长，单层细胞呈典型的铺路石状排列，第ⅦI因子相关抗原和细胞摄取Dil-Ac-LDL均呈阳性，内皮细胞比率可高达100％。生长曲线表明，第三代内皮细胞传代后延迟期小于1 d，对数生长期约为3 d，第5 d进入平台期，第7 d开始脱落死亡。所获得的内皮细胞对CSFv高度易感。本研究建立的血管内皮细胞分离培养方法简便有效，获得了大量的血管内皮细胞。