论文部分内容阅读
目的 通过共培养脐带间充质干细胞与人外周血B细胞,观察并分析脐带间充质于细胞对ITP患者B细胞分化及功能的影响.方法 收集2012年10月至2013年5月浙江省中医院血液科门诊及住院部ITP患者外周血10ml,Ficoll液密度分离法提取患者外周血B淋巴细胞.取健康婴儿脐带(来源于杭州市第一人民医院)酶消化法培养脐带间充质干细胞.以不同浓度的脐带间充质干细胞与患者外周血B细胞共培养4-5d,以胎牛血清为B细胞培养血清.选取5例健康供者作为正常对照.流式细胞术检测CD45、CD31确定脐带间充质干细胞纯度,ELISA法测B细胞分泌IgM,IgG能力.结果 (1)选取不同浓度刺激因子(PWM)浓度(lug/ml,10ug/ml,30ug/ml)刺激B细胞,检测B细胞在刺激因子作用下分化为浆细胞产生抗体的时间(2d,4d,7d),结果 刺激因子浓度为30ug/ml,作用时间4d,B细胞分泌IgG,IgM量达最大值,与正常对照组相比,同样浓度刺激因子和作用时间B细胞分泌IgG,IgM无明显差异(P值分别为0.163,0.075).(2) ITP患者各组内(每组各10例),1∶80浓度脐带MSC组IgG与1∶40浓度脐带MSC组,1∶20浓度脐带MSC组,1∶10浓度脐带MSC组IgG均有统计学差异(P值分别为0.048,0.015,0.022),10例ITP患者1∶80浓度脐带MSC组IgG分泌量(83.2064ng/ml)与正常对照组IgG分泌量(76.6524ng/ml)有显著差异(P=0.026).说明ITP患者IgG分泌量高于正常人,随着共培养脐带MSC浓度越高, IgG分泌量越少.不同浓度脐带MSC组与对照组IgM分泌量无明显差异(P值分别为0.275,0.159,0.114,0.146).结论 脐带间充质干细胞对B细胞分泌抗体IgG有抑制作用,对IgM作用尚不明确.