【摘 要】
：
脂肪酶(即甘油酯水解酶)在自然界中普遍存在,是一类能够催化水解、醇解、酯化、酯交换等多种化学反应的生物催化剂,在许多工业领域中广泛应用.本研究以来源于土壤宏基因组的脂肪酶SR1为研究对象,序列比对显示,脂肪酶SR1与Serratia marcescens胞外脂肪酶LipA的同源性最高为77％,以此进行同源建模获得SR1的空间三维结构,对其结构位点进行分析推测该酶活性中心催化三联体S-D-H中的Hi
【机 构】
：
西南科技大学生命科学与工程学院 四川 绵阳 621000;中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081
论文部分内容阅读
脂肪酶(即甘油酯水解酶)在自然界中普遍存在,是一类能够催化水解、醇解、酯化、酯交换等多种化学反应的生物催化剂,在许多工业领域中广泛应用.本研究以来源于土壤宏基因组的脂肪酶SR1为研究对象,序列比对显示,脂肪酶SR1与Serratia marcescens胞外脂肪酶LipA的同源性最高为77％,以此进行同源建模获得SR1的空间三维结构,对其结构位点进行分析推测该酶活性中心催化三联体S-D-H中的His314、Asp256是其发挥水解活性的关键位点,对脂肪酶催化三联体His314、Asp256进行位点突变,通过构建突变体,并在大肠杆菌中表达,纯化后获得D256E、D256N、H314A、H314F及H314K突变体蛋白及野生型SR1蛋白,以p-NPC 10为底物,测定野生型SR1和突变体蛋白的水解活性.
其他文献
目前西瓜全基因组测序及骨干育种材料的重测序工作已经完成,大量功能基因有待验证,在此基础上,将全面带动西瓜分子育种工作的快速发展.这个形势下,对建立一个高效的西瓜转基因技术体系提出了迫切需求.
Phalaenopsis amabilis is cultivated as an ornamental and has been used by breeders to produce many hybrids and cultivars.It is officially recognised as one the national flowers of Indonesia.
There are two major carbon sources for grain filling in rice:photoassimilates produced in mature leaves at the reproductive stage and non-structural carbohydrates (NSC) pre-accumlated in stems (leaf s
果实采后品质保持主要受制于两个因素,一是自身的衰老进程,而是病原菌引起的腐烂。衰老是果实生命中的一个重要阶段,直接影响果实抗性和品质。许多研究证明衰老是一个氧化现象,由活性氧(Reactive oxygen species,ROS)引起的线粒体氧化损伤是导致许多有机体衰老的重要诱因。
雌雄异株植物对高锰胁迫的差异反应的分子机理尚不清楚.我们分析了青杨雌雄植株在高锰胁迫4周后的生理和蛋白质组差异反应.发现在高锰胁迫下,雌雄在茎长和光合作用下降的程度高于雄株.
An automatic versatile system which integrated solid phase extraction (SPE) with ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) was developed.Diverse commercial SP
RG-Ⅱ是一种结构复杂的果胶多聚糖化合物,其结构在各种维管植物中具有很强的进化保守性.然而,关于RG-Ⅱ 的生物合成研究及其生理功能还不是很清楚.我们的研究通过对拟南芥的Microarry 数据分析,分离到一个受重金属镉(Cadmium,Cd2+)强烈诱导的基因Cdi.
Quantitative real-time PCR(qRT-PCR)has become an effective method for accurate analysis of gene expression in several biological systems as well as under different experimental conditions.
植物中广泛存在的二萜合酶通常具有α、β、γ三个结构域,在进化过程中结构域的变化赋予二萜合酶的功能多样性,使其广泛参与植物的代谢过程及与环境相互作用.通过序列分析发现玉米中的两个二萜合酶TPS1 (Terpene synthase 1)和KSL5(Kaurane synthase-like 5)不含有γ结构域.
为发掘极端环境土壤微生物资源,本研究对新疆火烧山、贾登峪、百口泉等9个干旱、高温、土壤盐碱含量高的极端环境的微生物资源进行收集、鉴定,为极端微生物资源的保护、开发利用及重要功能基因的探究提供重要的基础材料.研究采用稀释涂布法将采自新疆极端环境的24份土壤样品稀释涂布于TGY、LB、A15及限制性培养基进行菌落分离,共筛选获得137株菌,其中从有植被样方的样品中分离得到的微生物生物量高于无植被样方.