黄皮ISSR-PCR反应体系的优化

来源 :第二届全国果树分子生物学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuluzy
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目的:研究黄皮基因组DNA的提取方法,并优化ISSR-PCR反应体系。 方法:采用改良SDS法提取DNA。通过单因素和正交试验对ISSR-PCR反应体系进行优化。 结果:采用改良SDS法提取的DNA条带完整、无RNA污染,适于ISSR-PCR扩增。同时建立了最适黄皮ISSR分析的扩增体系:20μL的反应体系中含30 ng的模板DNA、1.5 u Taq DNA聚合酶、0.4 μmoI0.L-1引物、0.3mmol0.L-1dNTPs以及引物(gA)8C的最佳退火温度为520.4℃。 结论:建立了黄皮ISSR-PCR反应体系,确定了引物的最佳退火温度,为应用ISSR分子标记对黄皮种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。
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