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本文研究了灵芝总甾醇(GS)对体外培养大鼠皮层神经元缺氧再氧化损伤(H/R)的保护作用，并对其机制进行了初步探讨。通过体外原代培养SD大鼠大脑皮层细胞。以神经元特异性烯醇化酶(NSE)作为神经元标志物检验培养体系中神经元的纯度。神经元体外培养8天后，缺氧12小时再氧化24小时损伤神经元，建立神经元缺氧再氧化损伤(H/R)。损伤前10min预先给予GS(0.01，0.1，lμg/m)。用PI和Hoechst33258双标的方法鉴定神经元的生命状态，在激光共聚焦显微镜下观察荧光探针的标记情况。同时应用MTT法测定各组细胞的存活率和细胞代谢情况。应用荧光探针DCF—DA特异性标记细胞内自由基，以激光共聚焦显微镜观察神经元内自由基水平的改变。以裂解液来裂解细胞，用bradford方法鉴定蛋白含量。