论文部分内容阅读
目的： 采用UPLC-DAD-MS方法磷究氨溴特罗口服溶液中的有关物质,并初步确定主要有关物质的化学结构.仪器：Acquity UPLC(美国Waters公司)：含四元高压泵、在线真空脱气机、恒温自动进样器、柱温箱.Q-TOF microTM质谱仪(美国Waters公司)：电喷雾离子化接口的飞行时间质谱检测器.质谱工作站：Masslynx工作站(4.0版).色谱条件：色谱柱：Acquity BEH C18柱(2.1mm×100mm, 1.7μm)；流动相；甲醇-0.01％i酸铵(60：40)；流速：0.2ml/min：柱温；40℃.质谱检测参数：离子极性：正离子(Es+)；离子化方式：电喷雾离子化(EsI)；内标离子；氨溴特罗m/z：369.9684[M+H]+.Capillary (V)： 2800.0； Sample Cone (V)： 15.0； Desolvation Temp(℃)：300.0； Source Temp(℃)：1 10.0：MCP Detector(V)：2500.方法；制备氨溴特罗原料、氨溴特罗口服溶液热解35h样品和氨溴特罗有关物质富集液,采用UPLC-MS方法分析.结果：有关物质和氨溴索的色谱-质谱图对比研究氨溴特罗口服溶液热解35h样品(rj35h)采用DAD得到色谱图,氨溴特罗的保留时间为5.00min处；提取质量数m/z389、 m/z377的离子色谱,即得到原料溶液的提取离子色谱图和达峰时间处对应的质谱图(图1).由图1可见,氨溴特罗口服溶液热解35h样品(rj35h)提取离子m/z389,样品中得到tR=5.95min的色谱峰,含量较大,表明氮溴特罗口服溶液样品热解35h样品重的有关物质含量较多,可见m/z387、389、391一组离子峰,m/z387为含溴杂质的[M+H]+峰,初步确定该杂质的分子量为386,且化合物含溴元素.有关物质和氨溴索的紫外光港图对比研究 氨溴特罗口服溶液热解35h样品[RJ35h)采用DAD得到色谱图,分别对tR=5.00min、tR=5.95min的两个色谱峰提取紫外光谱图.由图可见,氨溴索的最大吸收波长为209、246、308nm,有关物质的紫外光谱最大吸收波长分别为204、240、315nm.由此推测该杂质与氨溴索的共轭体系可能发生了一些改变.有关物质和氨溴索的裂解规律对比研究氨溴特罗口服溶液中有关物质富集液(ZZ)调节Sample Cone (V)的电压,依次为6V、18V、30V、45V,由质谱裂解图可见二组质谱信号：m/z387/389/391、m/z289/2914/293,质量数相差98.而氨溴索的质谱裂解图由图1中可见其碎片离子为m/z262/264/266,质量数相差115.高分辨质谱解析有关物质的分子式：以氨溴素(C13H18N2OBr2)的[M+H]+蜂精确分子量,进行分子量校正(其准确分子离子数376.9864)后,对有关物质的m/z386.9868进行质量数校正,高分辩质谱推测其可能的分子组成为C14H17N2OBr2,该化合物的分子式为C14H16N2OBr2.结论；综合推测,氨溴特罗口服溶液中有关物质的分子式为C14H16N2OBr2,与氨溴素的质量数相差10,不饱和度增加了2(增加1个环合、1个双键),与文献投道的杂质相比,氨溴特罗和主要有关物质的质谱裂解见图2.从面确定氨溴特罗有关物质的化学结构.