【摘 要】
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内源性逆转录病毒(ERVs)在数百万年前整合到哺乳动物基因组中,并遵照孟德尔法则遗传给下一代.ERVs被认为是古代的外源性逆转录病毒(exogenous retroviruses)感染宿主后经进化
【机 构】
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内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特市 010018
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会
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内源性逆转录病毒(ERVs)在数百万年前整合到哺乳动物基因组中,并遵照孟德尔法则遗传给下一代.ERVs被认为是古代的外源性逆转录病毒(exogenous retroviruses)感染宿主后经进化形成的.驯化的绵羊基因组中至少包含27个拷贝的ERVs,由于与外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV)高度相似,故将其命名为enJSRVs.现有研究结果表明,enJSRV在母羊生殖道上皮细胞大量且特异性表达,提示enJSRV对生殖发育可能发挥重要作用.而且目前众多学者认为,绵羊单核滋养外胚层细胞(MTC)在enJSRV囊膜蛋白(ENV)及其受体透明质酸酶2(HYAL2)的相互作用下分化、移行,之后通过核内复制或融合作用形成滋养外胚层巨型双核细胞,继续融合形成多核合胞体,最终形成胎盘的子叶,说明绵羊内源性反转录病毒enJSRV囊膜蛋白在妊娠的过程中发挥了重要作用.为了enJSRV囊膜蛋白在绵羊胚胎发育过程中可能发挥的作用,本研究体外培养了绵羊绒毛膜多核滋养层细胞,当细胞汇合度为70％～80％时利用微量RNA提取试剂盒提取细胞总RNA,检测RNA的纯度及完整性后反转录为cDNA,根据enJSRV的全基因组序列,在env基因区域设计1对特异性引物并分别引入HindⅢ和ApaⅠ的酶切位点.筛选出1个干扰效率最高的RNA干扰质粒enJRSV-env-shRNA-2，为后续包装慢病毒及进行动物实验来揭示enJSRV-env的生殖生物学作用奠定基础。
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