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为研究高效猪基因工程免疫增强剂,本研究采用SOE-PCR方法通过一基因柔性接头(linker)将猪白介素2 (PoIL-2)、6(PoIL-6)基因构建成PoIL-2-linker-POIL-6嵌合基因并克隆入pQE-30原核表达载体中进行融合表达;通过专利蛋白纯化复性方法对表达的重组融合蛋白(rPoIL-2-linker-POIL-6)进行纯化。分别采用MTS法检测rPOIL-2-Iinker-POIL-6促猪外周血T淋巴细胞和猪脾脏淋巴细胞的增殖活性;分别采用POIL-2和PoIL-6 ELISA 试验方法检测rPoIL-2-linke-POIL-6蛋白特异性免疫反应的活性。结果:成功构建了POIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因。原核表达的rPoIL-2-Iinker-PoIL-6蛋白分子量大小约28 ku,蛋白纯化后纯度在96%以上。rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白分别与单rPoIL-2、rPoIL-6对照具有相近的生物学活性,可显著促进猪外周血淋巴细胞和猪脾脏细胞的增殖,并可与抗PoIL-2、PoIL-6单抗发生特异性免疫反应。研究结果初步证明了rPoIL-2-linker-POIL-6在体外具有单rPOIL-2和rPOIL-6蛋白的双重生物学活性,为下一步进行动物体内活性研究奠定了基础。