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目的:对重组大肠杆菌中尿苷磷酸化酶的诱导表达条件进行优化。
方法:利用乳糖代替IPTG诱导尿苷磷酸化晦的表达。检测尿苷磷酸化酶的活力,结合SGS-PAGE,优化诱导条件。
结果:菌体培养2.5h时加入诱导剂,诱导3h后得到的尿苷磷酸化酶的活力最高,10ug/ml的IPTG即可诱导目的蛋白大量表达,0.5mmol/L的乳糖与10 ug/m1的IPTG的诱导效果相当。
结论:可以用廉价无毒的乳糖代替昂贵有毒的IPTG对尿苷磷酸化酶进行诱导表达。