早期多次接种卡介苗对哮喘小鼠气道炎症及CD4+CD25+调节性T细胞通路的影响

来源 :中华医学会第六届全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第二次大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sorryhappy777
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目的:探讨早期多次接种BCG对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用是否伴随着CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其可能的作用机制。 方法:新生的C57BL/6小鼠随机分为3组:哮喘组,BCG(接种)组和对照组。BCG组在出生后第0、7、14天分别接种BCG,而OVA和对照组以等量的生理盐水注射;从第6周起,按照程序予OVA和BCG组卵白蛋白(OVA)致敏并激发,对照组予生理盐水处理。小鼠处死后,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中嗜酸粒细胞浸润的情况;使用流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中CIM+CD25+Treg细胞/CD4+细胞比例;RT-PCR和WesternBlot分别检测Foxp3 mRNA和蛋白的表达:脾脏中CTLA-4和GITR的表达也以RT-PCR检测:ELISA检测脾淋巴细胞上清中IL-4、IFN-γ、IL-10和TGF-β的水平。 结果:BCG接种显著减轻了哮喘小鼠BALF和肺组织中嗜酸粒细胞的浸润。哮喘小鼠脾淋巴细胞中CD4+CD25+Freg细胞/CD4+细胞比例低于对照组,BCG接种显著提高了此细胞比例。哮喘小鼠脾脏Foxp3 mRNA和蛋白的表达均高于对照组,BCG接种明显提高了Foxp3的表达。CTLA-4和GITR的表达也在BCG接种组有明显的升高。与对照组相比,哮喘小鼠脾淋巴细胞上清中存在高IL-4,低IFN-γ的失衡状态,BCG接种纠正了这种失衡的极化状态。BCG接种还明显提高了脾淋巴细胞上清中IL-10和TGF—β的水平。 结论:新生期多次接种BCG能有效减轻哮喘小鼠气道的变态反应炎症;哮喘小鼠存在CD4+CD25+Treg细胞相对数量和功能不足,Treg、Th1和Th2三极之间的失衡参与了哮喘的发病机制;接种BCG能纠正了Th1、Th2的失衡,促进CD4+CD25+Treg细胞的活化和关键的转录因子Foxp3表达的增加而产生免疫耐受机制,抑制了炎症反应;CTLA-4、GITR介导的细胞—细胞接触抑制和抑制性细胞因子IL—10和TGF-β可能参与了BCG引起的CD4+CD25+Treg细胞抑制作用的机制。
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