基于DNA-链酶亲和素自组装树枝状生物大分子构建增强型QCM核酸传感平台

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树枝状DNA是高度分支的、具有三维构型的生物大分子。本工作选择p53肿瘤抑制基因片段为模型,基于链霉亲和素(SA)和DNA材料,在石英晶体微天平(QCM)电极表面自组装树枝状生物大分子(DNA-SA-dendrimer)作为放大元件,构建了增强型QCM核酸传感平台。传感原理见图1。首先将捕获探针通过巯基自组装固定在QCM电极表面,结合p53目标序列后,通过链置换反应打开捕获探针的发卡结构,随后SA-DNA1与捕获探针杂交而结合到电极表面。在连接探针的桥联作用下,SA-DNA1可以与SA-DNA2进一步杂交。通过SA-DNA1和SA-DNA2的交替杂交即可在QCM电极表面自组装DNA-SA-dendrimer质量放大传感层1,因此极大提高了QCM核酸传感体系的灵敏度(图2)。对p53基因片段的线性范围为0.5–15nmol/L,检出限为0.4 nmol/L。通过改变QCM电极表面固定的捕获探针序列,发展的QCM生物传感体系可以应用于不同种类目标分子的分析检测。
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