论文部分内容阅读
目的:观察黄芪含药血清对肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMR)等的影响。
方法:体外培养肾小管上皮细胞(NRZ-52E)。分为3组:①10%正常大鼠血清组;②10%正常大鼠血清+TGF-β1组:③10%含黄芪大鼠血清+TGF-β1组。作用48h后,观察NRK-52E形态变化,RT-PCR法观察CTGFmRNA基因表达;Western blot法观察CTGF及α-SMA蛋白表达;流式细胞仪检测α-SMA表达。
结果:正常对照组NRK-52E细胞表达少量CTGFmRNA,加入含TGF-β1 10ng/ml刺激48h,CTGF表达量增加3.8倍,具有显著性差异(P<0.01);同时加入黄芪血清,可以减弱43%TGF-β1对CTGF表达的刺激作用(P<0.05)。Western blot显示,正常NRK-52E细胞蛋白水平的CTGF表达很弱,TGF-β1刺激后,CTGF表达升高3.6倍(P<0.01);同时加入黄芪血清,CTGF蛋白表达较加TGF-β1组减弱39%(P<0.05);正常的NRK-52E细胞表达微量α-SMA蛋白,TGF-β1 10ng/ml刺激48h α-SMA表达呈明显升高4.2倍(P(0.01);同时加入黄芪血清,明显抑制α-SMA的表达35%(P<0.05)。流式细胞仪检测结果示:TGF-β1 10ng/ml刺激48h,α-SMA阳性细胞表达百分率和平均荧光强度都增加(P<0.05);加入含黄芪血清,α-SMA阳性细胞表达百分率和平均荧光强度较上组明显减弱(P<0.05)。
结论:正常NRK-52E细胞表达微量CTGF及α-SMA,TGF-β,可刺激CTGF及α-SMA,而含黄芪大鼠血清能抑制CTGF及α-SMA表达。