【摘 要】
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目的分别从Wistar正常大鼠(8只)和2型糖尿病模型大鼠(8只)肾脏中提取纯化糖胺聚糖(GAG),以统计学方法对其GAG组成和含量进行比较分析。方法以高脂饲料喂养及小剂量注射链脲菌素(STZ,30 mg/kg)的方法构建2型糖尿病大鼠模型,定期测其血糖值,三周后处死取出肾脏。肾脏经脱脂后采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解、透析(MWCO 3500)、Dowex AG50-X2阳离子交换色谱和Sep
【机 构】
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中国药学会全国多糖类药物研究与应用研讨会论文集
【出 处】
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中国药学会全国多糖类药物研究与应用研讨会论文集
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目的分别从Wistar正常大鼠(8只)和2型糖尿病模型大鼠(8只)肾脏中提取纯化糖胺聚糖(GAG),以统计学方法对其GAG组成和含量进行比较分析。方法以高脂饲料喂养及小剂量注射链脲菌素(STZ,30 mg/kg)的方法构建2型糖尿病大鼠模型,定期测其血糖值,三周后处死取出肾脏。肾脏经脱脂后采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解、透析(MWCO 3500)、Dowex AG50-X2阳离子交换色谱和Sephadex G10凝胶色谱等方法从肾脏组织中提取纯化总GAG。以硫酸-咔唑法测定其总糖醛酸含量,以高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定其相对分子量,以醋酸纤维素膜电泳方法分析GAG种类并以灰度积分的方法计算各GAG的含量。结果糖尿病模型大鼠表现出体重下降、多饮多尿等2型糖尿病的症状,三周后其血糖值(23.7±2.5 mmol/L)远高于正常大鼠(4.0±0.4 mmol/L)(P<0.001)并且糖尿病模型大鼠肾脏重量(1.45±0.15 g)也明显高于正常大鼠(1.26±0.11 g)(P<0.001)。糖尿病模型大鼠肾脏GAG的总糖醛酸含量(3.9 mg/g干重)高于正常大鼠(3.3 mg/g),总GAG相对分子量(30.7×10~3)则显著低于正常大鼠(39.4×10~3)。醋酸纤维素膜电泳分析表明,大鼠肾脏中含有透明质酸(HA)、硫酸乙酰肝素(HS)、硫酸皮肤素(DS)以及少量硫酸软骨素(CS)。灰度分析表明,糖尿病模型大鼠肾脏中HS和HA总含量高于正常大鼠,而DS含量则有所降低。结论糖尿病模型大鼠和正常大鼠肾脏GAG无论在含量上还是组成上都存在明显的差异,该结论为从事GAG在糖尿病发生发展中的作用提供了参考。
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