体外培养Cajal间质细胞的形态及功能观察

来源 :2009年中国·杭州国际便秘专题学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanjiawei2005
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目的:研究ICC在体外培养过程中的形态学变化过程及其功能鉴定方法。 方法:体外分离、培养小鼠小肠ICC,应用ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光染色后在激光共聚焦显微镜下对其进行鉴定,应用光学显微镜和激光共聚焦显微镜观察其在体外生长30天的形态学改变过程,应用钙离子指示剂标记细胞内钙离子含量,在激光共聚焦显微镜下动态观察其钙离子振荡功能的变化。 结果:体外分离、培养的ICC,贴壁后24小时呈三角形或梭形,有少量突起:体外培养72小时的ICC即出现明显的长突起,并且可与周围ICC相互形成突触连接,培养一周以上的ICC可以形成广泛的连接。免疫荧光鉴定结果证实体外培养细胞为ICC,体外培养ICC具有钙离子振荡功能,大黄素能显著增强其钙离子振荡的频率和振幅。 结论:体外培养3天后的ICC可形成类似于体内的网络连接,并可以稳定培养至)30天以上。体外稳定培养ICC具有钙离子振荡功能。
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