【摘 要】
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目的:阐明UBE2L6基因在鼻咽癌中表达失活的机制,探讨其抑制肿瘤的分子机制。方法:应用半定量RT-PCR及免疫组化技术评价UBE2L6在鼻咽癌中的表达水平.利用甲基化特异性PCR及亚硫酸氢盐测序法检测UBE2L6基因DNA启动子区甲基化程度.以细胞生长曲线,克隆形成,流式细胞术方法评价UBE2L6基因如何影响鼻咽癌细胞系的生物学行为.采用BODIPY荧光脂质染料评价细胞内脂肪滴含量.通过免疫共沉
【机 构】
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耳鼻咽喉头颈外科,广西医科大学第一附属医院.530021 广西南宁市双拥路6号;微生物,肿瘤与细胞生物系,瑞典卡罗林斯卡医学院.17177 斯德哥尔摩市诺贝尔路16号
【出 处】
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中国病理生理学会第十四届肿瘤专业委员会、第十五届免疫专业委员会联合学术会议
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目的:阐明UBE2L6基因在鼻咽癌中表达失活的机制,探讨其抑制肿瘤的分子机制。
方法:应用半定量RT-PCR及免疫组化技术评价UBE2L6在鼻咽癌中的表达水平.利用甲基化特异性PCR及亚硫酸氢盐测序法检测UBE2L6基因DNA启动子区甲基化程度.以细胞生长曲线,克隆形成,流式细胞术方法评价UBE2L6基因如何影响鼻咽癌细胞系的生物学行为.采用BODIPY荧光脂质染料评价细胞内脂肪滴含量.通过免疫共沉淀和Western blot方法验证UBE2L6编码的蛋白介导的ISGylation影响细胞内脂肪酶的表达。
结果:UBE2L6基因在鼻咽癌细胞系及原发肿瘤中表达下调,相对正常鼻咽上皮组织其DNA启动子区CpG岛呈高频率甲基化改变.UBE2L6蛋白在鼻咽癌癌巢中的表达显著低于癌周组织,且生存分析显示UBE2L6蛋白表达低的患者预后较差.外源性表达UBE2L6基因可抑制鼻咽癌细胞的生长及克隆形成能力,并诱导细胞发生凋亡.另外,发现鼻咽癌细胞中有脂肪滴聚集,明显高于正常鼻咽上皮细胞.转染UBE2L6基因的鼻咽癌细胞甘油三酯脂酶(ATGL)表达升高,同时可观察到脂肪滴含量显著下降。
结论:UBE2L6基因是鼻咽癌的候选肿瘤抑制基因,可作为鼻咽癌预后评价指标之一;其可能的抑癌分子机制是通过稳定ATGL的表达而促进细胞内脂肪滴代谢。
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