全发根DNA损伤彗星电泳检测方法的建立

来源 :第七届中国核学会“三核”论坛暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bleachji
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  背景:鉴于目前反恐斗争及核事故应急的需要,急待快速灵敏而又取材方便的新检测方法来替代需时较长的染色体金标准方法,对现场大批量受照人员做出快速分类,以利临床有针对性地进行治疗。彗星电泳是一个快速灵敏准确的检测DNA损伤的方法,一经问世,就在很多领域得到广泛应用。该方法可以在单个细胞水平上检测DNA损伤,需要的样本量很少,凡是能制备成细胞混悬液的样本都可直接应用本方法进行检测。但是对于不能制备成细胞混悬液的样本(如毛发)能否应用彗星电泳的方法来检测其DNA损伤,目前尚未见报道。目的:探索全发根毛囊细胞彗星电泳用于辐射剂量检测的可行性。方法:取人全发根,用双氧水和射线照射致发根细胞DNA损伤,参照单细胞凝胶电泳的方法,适当延长裂解时间和电泳时间,用PI染色,荧光显微镜下观察全发根细胞的DNA损伤情况。结果:对照组未出现彗星现象,双氧水处理组及射线组的发根细胞均出现明显的彗星现象,且拖尾部分中的荧光强度也明显增强。结论全发根彗星电泳可用于检测由化学因素及物理因素引起的细胞DNA损伤,有可能发展成为一种用于快速检测辐射剂量的新的生物剂量计。讨论:彗星电泳的标准化是不同实验室之间结果相互比较的基本条件,寻找一个较优的裂解、伸展、电泳及染色等参数的组合,将会大大促进彗星电泳应用范围。
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