【摘 要】
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藻红蛋白具有优良的荧光特性,是一种新型的荧光标记探针。本研究以藻红蛋白为荧光探针,探讨了藻红蛋白标记技术及荧光标记物在免疫检测领域的应用。采用红毛藻为原料,硫酸铵
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藻红蛋白具有优良的荧光特性,是一种新型的荧光标记探针。本研究以藻红蛋白为荧光探针,探讨了藻红蛋白标记技术及荧光标记物在免疫检测领域的应用。采用红毛藻为原料,硫酸铵分级盐析和DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析,从红毛藻中分离纯化得到了纯度系数(A565/A280)大于5.0的R-藻红蛋白。采用异型双功能交联剂SPDP作为交联剂,将纯化的R-藻红蛋白分别与兔抗大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)IgG(一抗)和羊抗鼠IgG(二抗)交联聚合。SDS-PAGE和荧光分析表明,R-藻红蛋白能分别与羊抗鼠IgG、兔STI IgG偶联。对交联后的荧光标记物通过Western Blot进行检测,结果显示,R-藻红蛋白标记的抗体能检测抗原的存在,且有较好的特异性。本研究提供了快速检测抗原的方法,利用藻红蛋白荧光标记物能缩短免疫杂交的检测时间,简化操作过程。
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