【摘 要】
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目的 本研究通过整合位点序列的克隆及其相关序列特征的研究,阐述外源基因整合机制,探讨多整合位点遗传问题,为繁育纯合子提供指导作用,并为分析外源基因的遗传稳定性奠
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150069;甘肃农业大学动物科学技术学院,兰州730070中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨1500
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目的 本研究通过整合位点序列的克隆及其相关序列特征的研究,阐述外源基因整合机制,探讨多整合位点遗传问题,为繁育纯合子提供指导作用,并为分析外源基因的遗传稳定性奠定基础.方法 本试验以RIG-Ⅰ转基因鸡为试验材料,运用Western blot分析6只转基因鸡RIG-Ⅰ基因表达;通过对F0代0468号进行热不对成交错PCR,对其进行外源基因整合位点的检测与测序分析.结果 外源基因RIG-Ⅰ在转基因鸡体内正常表达.通过NCBI网站BLAST程序的比对分析,Founder代0468号发现5个分离的整合位点(3、5、8、9和13号染色体),分别命名为TgInS 1、TgInS2、TgInS3、TgInS4和TgInS5.通过在各整合位点设计验证引物,发现其后代存在整合位点分离现象.结论 上述实验结果表明:表达RIG-Ⅰ的F0代转基因鸡携带的外源基因能够遗传至F1代及F2代,能够通过生殖系遗传给后代,表现出种系传递.
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