【摘 要】
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根据猪流感病毒M基因的序列分析结果,设计了一对扩增M基因特异性引物.采用该技术对H1、H3、H5和H9 4个亚型猪流感病毒标准参考株,RT-PCR检测的结果都呈阳性,对猪副粘病毒、圆环病毒2型、猪呼吸与繁殖综合症病毒、猪伪狂犬病毒RT-PCR扩增结果都呈阴性.RT-PCR最少可检测到1000EID50的病毒核酸.采用该对引物,直接从猪流感病毒感染小鼠的组织样品中提取核酸,RT-PCR阳性结果和鸡胚
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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根据猪流感病毒M基因的序列分析结果,设计了一对扩增M基因特异性引物.采用该技术对H1、H3、H5和H9 4个亚型猪流感病毒标准参考株,RT-PCR检测的结果都呈阳性,对猪副粘病毒、圆环病毒2型、猪呼吸与繁殖综合症病毒、猪伪狂犬病毒RT-PCR扩增结果都呈阴性.RT-PCR最少可检测到1000EID50的病毒核酸.采用该对引物,直接从猪流感病毒感染小鼠的组织样品中提取核酸,RT-PCR阳性结果和鸡胚分离病毒结果一致.应用本方法只用6个小时就可得出准确的诊断结果,试验结果证明建立的RT-PCR检测方法敏感特异,可用于猪流感的快速诊断.
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本研究针对EHEC O:H的stx基因通过PCR扩增出缺失了183bp的stx基因片段,将其克隆到自杀性载体pCVD442中,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒pCVD442::△stx从SM10pir转到O:H中,利用抗性标记和PCR方法筛选出O:H stx基因缺失突变菌株.Vero细胞毒性实验证实该突变株不能产生完整的Stx.动物实验表明与强毒株相比该突变株的致病性明显降低.该突变株的构建为研
选择临床健康的1.5-2月龄的无猪瘟病毒感染和无猪瘟抗体的大白猪,共17只.分三组,A组接种猪瘟兔化弱毒,B组接种猪瘟石门强毒,C组为阴性对照.定期采集三组猪的抗凝血和血清进行16项生理指标15项生化指标的测定.将测定结果进行t检验表明:A组与B组生理生化指标差异显著的是ALB;A组与C组生理生化指标差异显著的是TBIL、PCT;B组与C组生理生化差异显著的是BUN、PCT、PLT、GR%.
根据GenBANK的核酸序列,设计8对引物从TGEV模板中分别扩增了1.9kb、1.6kb、1.5kb、2.0kb、1.1kb,1.4kb,1.4kb,1.3kb共8个片段,经测序拼接后获得8495 bp的TGEV序列.根据与其他TGEV和冠状病毒的序列和结构特征比较表明,该段序列克隆了除TGEV聚合酶基因以外的S、M、N、E、NSP3A、NSP3B、ORF7S、M、N、E、NSP3A、NSP3B
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