【摘 要】
：
目的：观察胰岛素受体底物-1表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响。方法：针对小鼠IRS-1基因开放阅读框上的2个区域合成shRNA(M和MH),以pGenesil-1 vector为载体构建带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)靶标的shRNA质粒。以脂质体Lipofectamin TM 2000介导转染3T3-L1前脂肪细胞,并设
【机 构】
：
中南大学湘雅二医院检验科 中南大学湘雅二医院内分泌研究所,湖南长沙 410011
论文部分内容阅读
目的：观察胰岛素受体底物-1表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响。
方法：针对小鼠IRS-1基因开放阅读框上的2个区域合成shRNA(M和MH),以pGenesil-1 vector为载体构建带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)靶标的shRNA质粒。以脂质体Lipofectamin TM 2000介导转染3T3-L1前脂肪细胞,并设阴性对照(HK)载体转染组。细胞转染后,G418筛选稳定表达的阳性克隆并通过Western blot鉴定。应用3-异丁基-1-甲基黄噤呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,lBMx)0.5mM,地塞米松(Dexamethasone,DEX)10-6M和胰岛素(Insulin,Ins)5 μg/mL分别诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞空白对照组、阴性对照(HK)载体转染组、M和MH转染组分化,在诱导分化的不同时间点收集细胞。用Western Blot检测PPARγ的表达。脂肪细胞内脂滴用油红O染色观察。
结果：与空白对照组、阴性对照组和转染M组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞相比,转染MH组IRS-1shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞IRS-1蛋白表达水平降低70％以上;而MH转染组细胞PPARY蛋白的表达与前三组3T3-L1前脂肪细胞比较无改变。前三组3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞成功，PPARy蛋白的表达存脂肪细胞分化成熟过程中逐渐增高，油红O染色显示，随着脂肪细胞的分化成熟，桔红色脂滴逐渐增多；而转染MH组IRS-1 shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞经诱导，油红O染色桔红色脂滴显著减少，直到分化的第8天，才见少许桔红色脂滴，且PPARγ蛋白的表达无变化。
结论：IRS-1基因沉默后可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化，并在分化过程中抑制PPARγ的表达,说明IRS-1通过调节PPARγ的表达或与PPARγ共同作用在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥决定性作用。
其他文献
目的：评价超声引导定位切除临床触诊不清的乳腺微小病灶的临床应用价值。方法：采用超声引导将21例患者的29个肿块置入乳腺定位针后进行手术切除,结果：29个肿块完整切除,平均肿块直径1.0±0.5cm。术后病理：良性23个(79.3％),恶性6个(2.06％)。并对其良恶性、病理分期、病灶大小及TNM分期进行比较分析。6例乳腺癌,病理构成：导管内癌3例,浸润性癌3例;且均为Ⅰ期或Ⅱ期;出现定位针移位2
增龄相关记忆障碍(Age Associated MemoryImpairment，AAMI)可占老年人1/3左右，必须加以重视。高龄老人中仍可有1/4至1/3认知功能检测在正常范围，这是我们重点保护的对象。本文介绍了AAMI发病危险因子及发病机理，提出AAMI的防治措施。
氧化损伤致衰老理论认为机体的衰老是由活性氧自由基引起的。线粒体是细胞的能量源，同时也是机体产生活性氧自由基的最重要的场所。热量限制是除遗传操作以外广为接受的延长寿限并延缓衰老的方法，现已发现在多种生物体的热量限制过程中机体活性氧自由基的水平降低，而线粒体活性增加，呼吸作用加强。在哺乳动物热量限制过程中，SIRT1去乙酰化酶-PGC-1α信号通路对线粒体的生物合成发挥重要的调节作用。
人生长激素是由腺垂体分泌的由191个氨基酸残基组成的直链多肽，它可以直接或通过胰岛素样生长因子间接地对生长和代谢发挥作用，既往主要用于儿童生长激素缺乏症的治疗。随着预期寿命的延长,人们越来越重视生活质量的提高，各种抗衰老药物不断出现,根据衰老学说之一的神经内分泌衰竭学说，生长激素近来被用于抗衰老治疗。在成人，生长激素可增加去脂肪体重，增加骨密度，改善生活质量。本文就生长激素的一般理化特性和其在健康
目的：观察复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠血糖，血清胰岛素，胰岛素敏感外周组织肝脏、骨骼肌、脂肪IRS-2基因表达的影响。方法：45只10周龄雌性Wistar大鼠，设正常对照组15只,余30只以小剂量链脲佐菌素(28mg/kg体重)腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型，将成模大鼠随机分为模型组和中药组。给予相应药物干预8周，8周时测定大鼠腹腔糖耐量试验的0h、2h血糖。处死后测定血清胰岛索，以
天然食物成分对正常与自然衰老或AD痴呆模型动物学习记忆功能影响的研究，显示大量人类最常用的食物除其营养价值外尚有显著的保健作用，其中以对人类精神心理健康最为重要的学习记忆能力尤为珍贵。本文简介绿茶、大蒜、红霉米、莲、鹰嘴豆芽和茴香等改善学习记忆的作用。
妊娠合并糖尿病临床诊断与治疗推荐指南中华医学会妇产科学分会产科学组中华医学会围产医学分会妊娠合并糖尿病协作组概念妊娠合并糖尿病。糖尿病合并妊娠(DM)：在原有糖尿病的基础上合并妊娠。妊娠期糖尿病(GDM)：妊娠期首次发生或发现的糖尿病，包含了一部分妊娠前已患有糖尿病但孕期首次被诊断的患者。本文现介绍妊娠期糖尿病的临床诊断及治疗方法，并对其规范化管理措施进行综述。
遗传代谢病(inherited metabolic diseases，IMD)种类繁多，临床表现复杂多样，且缺乏特异性，常因发病年龄、临床严重程度以及遗传方式的不同而存在不同亚型，临床诊断极为困难。大多IMD在急性发作期病情凶险，死亡率和伤残率高。常造成神经系统不可逆损伤。而及时诊断和处理，可以改善部分疾病的症状,减少伤残，甚至挽救生命。本文简述IMD的急性期表现、检查与处理，以期有助于本病的临床
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic—ischemiaencephalopathy，HIE)是指由于围产期缺氧窒息，导致的脑缺氧缺血性损害,包括特征性的神经病理及病理生理过程，并在临床上出现一系列脑病的表现，部分小儿可留有不同程度神经系统后遗症。由于在重症患儿可严重降低生活质量,故多年来引起国内外学者、社会、家长的广泛关注。我国儿科学术界自二十世纪八十年代末以来.对该病进行基础与临床的全面研究，加
巨细胞病毒(CMV)及梅毒螺旋体为宫内感染中最常见的病原体，可能造成流产、畸形、死胎、早产及胎儿宫内发育迟缓，新生儿也可出现类似败血症的全身感染中毒症状，如发热、贫血、黄疸及肝脾肿大，甚至危及生命，对优生优育威胁极大。而CMV合并梅毒的先天性混合感染引起的多器官、多系统损害鲜见报道。本文就感染科收治的1例巨细胞病毒感染合并早期先天性梅毒的新生儿进行报道。