PKA调控TRPV1敏化介导CGRP表达探讨疏肝健脾方干预肠易激综合征研究

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目的:通过观察肠易激综合征(IBS)大鼠结肠粘膜组织形态、超微结构及PKA、TRPV1、CGRP的表达变化,探讨疏肝健脾方治疗IBS可能机制。方法:72只清洁级雄性大鼠按体重随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方组(低、中、高剂量)和西药对照组;用辣素灌胃结合束缚应激刺激法复制IBS大鼠模型。正常组予同步饲养;疏肝健脾方组分别按成人用剂量的3,6,12倍给药;西药对照组予匹维溴胺;模型组予等剂量生理盐水;连续灌胃2周。第5周末处死所有大鼠,取结肠组织并应用HE染色法和甲苯胺蓝染色法检测病理组织学改变及肥大细胞阳性表达情况;采用Western-blot技术和荧光定剂量PCR检测大鼠结肠PKA、TRPV1、CGRP的表达情况。结果:光镜下见各组黏膜及黏膜上皮绒毛完整,排列规则,偶见少许炎症细胞,未见粘膜下血管扩张及弥漫性炎症浸润改变,腺体结构、排列正常。提示大鼠结肠未见器质性病变。正常组除外,各组肥大细胞阳性表达增高。以上提示IBS造模成功。模型组大鼠结肠组织中PKA、TRPV1、CGRP表达均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。疏肝健脾方低、中、高剂量组PKA、TRPV1、CGRP表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。疏肝健脾方低、中、高剂量组PKA、TRPV1、CGRP蛋白表达与正常组及西药对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:疏肝健脾方可能通过PKA调节IBS大鼠TRPV1、CGRP的变化,是其发挥疗效的作用机制之一。
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