【摘 要】
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目的:外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphomas,PTCLs)源于成熟的胸腺后淋巴细胞,是一类少见的生物学行为及临床表现高度异质性疾病,预后差.包装EZH2基因RNA干扰(RNA interfernce,RNAi)慢病毒载体,可以为今后相关实验研究奠定基础.方法:EZH2-shRNA质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染2
【机 构】
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天津医科大学肿瘤医院淋巴瘤科 天津医科大学基础医院院细胞生物学系
【出 处】
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第八届中国肿瘤内科大会、第三届中国肿瘤医师大会暨中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2014年学术年会
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目的:外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphomas,PTCLs)源于成熟的胸腺后淋巴细胞,是一类少见的生物学行为及临床表现高度异质性疾病,预后差.包装EZH2基因RNA干扰(RNA interfernce,RNAi)慢病毒载体,可以为今后相关实验研究奠定基础.
方法:EZH2-shRNA质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,进行慢病毒包装.病毒载体转染Hut78细胞后,观察感染效率,用RT-PCR和Western blot检测EZH2基因mRNA和蛋白的表达水平.
结果:功包装慢病毒表达载体,感染Hut78细胞,效率在95%以上.经RT-PCR和Western blot检测,结果显示EZH2基因在靶细胞中的表达水平降低.
结论:功包装并鉴定EZH2基因RNAi慢病毒表达载体.
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