EZH2基因RNAi慢病毒载体的包装及鉴定

来源 :第八届中国肿瘤内科大会、第三届中国肿瘤医师大会暨中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:victim1031
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphomas,PTCLs)源于成熟的胸腺后淋巴细胞,是一类少见的生物学行为及临床表现高度异质性疾病,预后差.包装EZH2基因RNA干扰(RNA interfernce,RNAi)慢病毒载体,可以为今后相关实验研究奠定基础. 方法:EZH2-shRNA质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,进行慢病毒包装.病毒载体转染Hut78细胞后,观察感染效率,用RT-PCR和Western blot检测EZH2基因mRNA和蛋白的表达水平. 结果:功包装慢病毒表达载体,感染Hut78细胞,效率在95%以上.经RT-PCR和Western blot检测,结果显示EZH2基因在靶细胞中的表达水平降低. 结论:功包装并鉴定EZH2基因RNAi慢病毒表达载体.
其他文献
由于运动伪差干扰,利用反射式光电脉容积脉搏波计算心率通常误差较大.为了解决该问题,本文设计了一种腕式心率监测装置,通过反射式光电传感器和三轴加速度传感器分别采集脉搏波和运动信息,利用运动状态分析、自适应噪声抵消和谱峰搜索的方法提取心率值.对5名受试者进行静止、走动、跑动状态下的心率监测实验,并同时采集心电信号进行心率对比,结果表明两种方法具有良好的一致性,本文设计的反射式心率监测装置可以有效抑制运
磁共振成像技术凭借其安全无辐射等优点,已成为最流行的影像工具,广泛应用于科学研究和临床诊断.准确的检测出磁共振图像的显著变化区域,是神经影像领域最核心的问题之一.目前最优的统计检验方法为:最新提出的基于参数模型的团簇检验方法(CST)和基于非参数模型的类团簇检验方法(TFCE).这两种方法均不受空间平滑度的限制,尤其适用于组间磁共振数据分析.然而目前仍没有研究揭示这两种方法在组间分析时的差异,本文
脑电信号幅值事实上是采集电极与参考电极的电位差值经放大器放大得到的.为了使采集所得信号幅值更接近采集电极处的真实电位,电极分布与参考电极的选择至关重要.本文基于脑电仿真技术,较系统地比较了不同电极分布(8种导联数和两种技术标准(BP、EGI))和不同参考(5种采集参考(Cz、Fz、Oz、Pz、LM)和3种重参考(BM、AR、REST))对脑电信号幅值的影响,结果发现参考对幅值影响最大,选择REST
与传统盲杖相比,电子盲杖虽然利用了测距设备延长了其距离感知范围,但是具有测距不稳定的严重缺陷.因此,利用MEMS加速度计和陀螺仪设计一种用于主动式测险盲杖的传感器稳定台,以获取稳定的距离信息.本文设计的稳定台系统主要由MEMS传感器、伺服舵机和超声测距模块组成,并利用本文提出的改进的互补滤波方法可准确的融合加速度计和陀螺仪的信息,得到盲杖的姿态角,以驱动电机进行反向补偿.对系统进行了精确度和稳定性
目的:成骨细胞主导的骨形成与破骨细胞主导的骨吸收维持着骨骼系统的骨代谢,当破骨细胞的形成和骨吸收功能发生异常时,就会导致例如骨质疏松症、骨硬化症等疾病[1,2].临床、动物实验都证实脉冲电磁场(PEMF)有良好的促进骨形成的作用[3,4].然而在细胞层面上,PEMF 作用于破骨细胞时的最优参数选择以及作用原理都不明确.因此,选取不同强度的PEMF 刺激破骨细胞前体细胞,观察其对破骨细胞的生成、分化
会议
The traditional immunochromatographic assay strips utilizecolloidal gold labeled antibodies as a marker.Here we introduced carbon dots into an immunochromatographic assay for quantitative detection of
目的:拓扑异构酶Ⅱα(TopoisomeraseⅡalpha,TopⅡα)是DNA修复过程中的关键酶,使其成为包括多柔比星和表柔比星在内的许多乳腺癌抗肿瘤药物作用的重要靶点.本研究旨在探讨TopⅡα及其编码基因TOP2A在乳腺癌FEC术后辅助化疗的患者的预后判断价值.方法:本研究运用了免疫组化的方法,回顾性地分析了201例乳腺癌患者的石蜡切片中TopⅡα蛋白的表达情况.研究纳入的所有患者均行乳腺癌
目的:检测不同分子亚型乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的数目,并分析其临床意义.方法:应用Moflo XDP超高速流式细胞仪测定62例不同分子亚型乳腺癌外周血CTCsEpCAM、CK18和CD45的表达情况,以循环肿瘤细胞(CTCs)数目≥5个/7.5ml外周血定义为微转移阳性.结果:本法检测CTCs的敏感性为10-6.不同乳腺癌分子亚型的CT
Co-delivery of antitumor agents has a potential to efficaciously treat human diseases via their synergetic effects.In this report, we prepared nanoparticles (NPs) for co-delivery of cisplatin (CDDP),
会议
目的:越来越多的证据显示microRNA(miRNAs)的调节异常与恶性肿瘤的转归息息相关.本研究意在探讨miR-650参与调控肺腺癌细胞多西他赛耐药的分子机制和临床意义.方法:实时定量PCR法用于检测肺腺癌组织和细胞中miR-650的表达;免疫印迹法和免疫组织化学法用以检测体内外ING4表达;运用MTT和克隆形成实验评估化疗药物敏感性变化;流式细胞技术、Hoechst染色和caspase-3活性