小麦赤霉病主要是由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)引起的一种麦类病害,在全球范围内均有发生,目前生产上对于小麦赤霉病的防治主要依靠化学药剂防治。三唑类药剂是防治小麦赤霉病三大类杀菌剂之一,防治效果较好。该类杀菌剂主要作用于甾醇生物合成中的14α-脱甲基酶(CYP51),使真菌麦角甾醇的合成受阻,从而破坏细胞膜功能,起到杀菌的功能。禾谷镰刀菌FgCYP51A基因编码14α-脱甲基酶,与病原菌对三唑类杀菌剂的敏感性密切相关。为了探究CYP51A基因在三唑类杀菌剂对禾谷镰刀菌的药效中的作用。作者采用PEG介导的原生质体转化split-marker PCR片段法将扩增获得的带有潮霉素标签的混合片段转化到F. graminearum PH-1制备的原生质中,获得了FgCYP51A的敲除转化子,并进行了验证,筛选出了ΔFgCYP51A菌株。随后采用菌丝生长速率法测定了禾谷镰刀菌ΔFgCYP51A菌株对五种三唑类杀菌剂的EC50值,ΔFgCYP51A菌株对丙环唑、戊唑醇、烯唑醇、三唑醇和三唑酮的EC50值分别为0.024 mg/L,0.012 mg/L,0.148 mg/L,0.154 mg/L和0.474 mg/L。根据FgCYP51A基因敲除转化子对于不同三唑类杀菌剂敏感性的差异变化,将五种三唑类杀菌剂分为两类。第一类包括戊唑醇、三唑醇、三唑酮和丙环唑,FgCYP51A基因敲除体敏感性显著上升;第二类为烯唑醇,敲出体对其敏感性无明显变化。本研究证明了FgCYP51A基因与禾谷镰刀菌对三唑类杀菌剂的敏感性相关,为生产上合理使用杀菌剂防治小麦赤霉病以及减少抗药性现象发生提供了理论依据。