目的:探讨染色精子质控片正常形态范围的确定方法 ,以便为需要实行内部质量控制(IQC)或外部质量控制(EQC)的男科实验室提供具有高准确性靶值的形态学质控片。方法:按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》第五版对4名检测人员进行精子形态分析培训,使其技术水平达到本实验要求。由技术最为娴熟的一位检测人员来制备本实验用精子形态学涂片。选取精子浓度约30×10~6/ml的一份精液标本,经离心、洗涤,稀释到2ml混匀,用重复抽样制备涂片的方法制备50张涂片,采用全自动染色机一次性完成Diff-Quik染色。在全部染色涂片中随机抽取10张涂片作为检查样本,由4名检测人员在同一台精子分析仪上分别对抽取的样本逐一进行分析。本实验规定每张涂片必须分析两次,每次分析200条精子,两次分析结果必须经过95%可信区间检验,以均值得出精子正常形态的百分率。将4名检测人员的所有检测结果进行统计学处理,绘制成Xbar图并监测各样本的均值是否处于控制限内,若各均值全部在警戒限以内,则可确定所有涂片的正常形态的靶值,范围为Xbar±2SD,结果:本实验10张涂片的精子正常形态百分率的均值都处于Xbar图的警戒限内,由此确定50张精子涂片的正常形态范围是6.78～9.42%。结论:采用此种严格的分析方法对用同一标本制备的批量Diff-Quik染色涂片进行精子正常形态百分率靶值评估,可能比较接近其真值,该批量涂片均可作为男科实验室精子形态学的质控片。