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肺癌是世界范围内发生率和死亡率较高的癌症之一，其中非小细胞肺癌占80％左右.研究表明，检测非小细胞肺癌患者EGFR基因突变可用于指导TKI靶向药物的使用及耐药突变的检测[1].本研究建立了实时荧光PCR偶联级联核酸侵入反应的方法对EGFR基因TKI用药相关基因突变进行了定量检测，检测灵敏度可达到10个拷贝每管反应，检测特异性最高可达到0.1％，利用实时荧光PCR的定量性能，可对突变含量进行定量检测.我们对临床39组织样本和1例血浆游离DNA样本进行了检测，并与ARMS方法的检测结果进行了比较，证明了检测方法的可行性和准确性，为临床非小细胞肺癌靶向药物使用和检测耐药发生提供了有效的检测工具.