【摘 要】
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目的:探讨IL-27对人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(Dendritic cell,DC)形态和功能的影响及其作用机制.方法:从正常健康人外周血中分离出单个核细胞,将其用GM-CSF,IL-4体
【机 构】
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河北医科大学第四医院科研中心河北医科大学第四医院科研中心;河北医科大学第四医院临床生物细胞科
【出 处】
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第八届全国“体外诊断学新技术、新方法、新概念、新进展”学术研讨会暨第二届“阳普医疗杯”临床检验诊断学硕博论坛
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目的:探讨IL-27对人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(Dendritic cell,DC)形态和功能的影响及其作用机制.方法:从正常健康人外周血中分离出单个核细胞,将其用GM-CSF,IL-4体外培养7天,并于培养第5天加入不同刺激因子分为四组:阴性对照组、阳性对照组(TNF-α:20ng/ml)、IL-27(20ng/ml)实验组、IL-27协同TNF-α组(即双细胞因子组,TNF-α:l0ng/ml+IL-27:10ng/ml).用倒置显微镜观察第7天DC的形态,用流式细胞术检测DC表面共刺激分子CD1a和CD83的水平,用ELISA的方法检测DC培养上清中细胞因子IL-12、IFN-γ的分泌水平,用RT-PCR的方法检测DC表面趋化因子受体CCR5、CCR7的表达,用Western-blot法检测DC信号通路蛋白P-STAT1/STAT3的含量.结果:光镜下,IL-27实验组和双细胞因子组诱导至第7天DC呈现典型的成熟形态学特征,其DC表面CD1a、CD83、趋化因子受体CCR7、转录因子蛋白P-STAT1/STAT3水平以及DC培养上清中细胞因子IL-12、IFN-γ的分泌水平较阴性对照组明显上调(P＜0.05),而CCR5表达含量则明显下降(P＜0.05),以双细胞因子组更为明显.结论:体外实验中,细胞因子IL-27可以直接或者协同TNF-α诱导DC成熟,其机制可能通过活化P-STAT1/STAT3信号通路.
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