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顺铂(cisplatin,DDP)是目前治疗卵巢癌的一线化疗药物,但铂类耐药的产生严重影响化疗的临床效果,逆转化疗耐药和提高患者疗效及生存率一直是卵巢癌治疗的难题。雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)是从卫矛科植物雷公藤中提取的主要有效成分,研究表明其具有广谱的抗肿瘤作用,表现为抑制体内外肿瘤的生长及诱导多种肿瘤细胞凋亡。本课题组前期研究发现小剂量TPL可诱导耐顺铂卵巢癌细胞株COC1/DDP凋亡,C0C1/DDP株为国内建系,是从人卵巢腺癌细胞中分离出的对DDP耐药的细胞亚株,而SKOV3/DDP细胞株为国际公认的经典DDP耐药细胞株,故本研究采用SKOV3/DDP为研究用细胞株。目的:通过体外实验观察雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的凋亡诱导作用,评价其临床应用价值,为使雷公藤内酯醇有望成为失去手术机会的晚期或耐化疗卵巢癌病人的有效治疗和/或增敏药物提供体外实验与理论依据。方法:1.人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP细胞培养于含0.375 ug/ml DDP、10%FBS、含100 U/ml双抗RPMI-1640培养基中,置于37℃,5%C02孵箱中常规培养。SKOV3/DDP细胞为贴壁细胞,当细胞生长融合成致密单层后(覆盖率大约达到80-90%),以1:3比率传代,2~3天可传代一次。2.用不同浓度(0 nM、12.5 nM、25 nM、50 nM、100 nM)的TPL分别处理耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3/DDP 24 h、48 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SKOV3/DDP细胞的存活率。3.用不同浓度(0 nM、12.5 nM、25 nM、50 nM、100 nM)的TPL分别处理耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3/DDP 24 h后,应用流式细胞术检测TPL对SKOV3/DDP细胞凋亡率的影响。结果:1.用不同浓度(12.5 nM、25 nM、50 nM、100 nM)的TPL分别处理SKOV3/DDP细胞24、48 h后,细胞平均存活率分别为95.192%±0.048%、87.106%±0.379%、65.943%±0.112%、56.426%±0.285%、77.165%±0.228%、64.313%±0.656%、34.452%±0.798%、24.824%±1.450%。2.用不同浓度(12.5 nM、25 nM、50 nM、100 nM)的TPL分别处理SKOV3/DDP细胞24 h后,细胞平均凋亡率分别为12.53%±0.42%、22.87%±0.31%、35.47%±0.16%、52.19%±0.27%。结论:TPL具有显著抑制耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞SKOV3/DDP的增殖,并诱导其凋亡的作用。本实验结果可为雷公藤内酯醇应用于耐顺铂卵巢癌患者的临床治疗提供科学的理论依据,使得提高恶性卵巢肿瘤铂类耐药的治疗效果,延长恶性卵巢肿瘤患者生存期、提高其生存质量成为可能。