肉毒毒素(Botulinum toxin)最早由Van Ermengen E在1897年调查比利时Ellezelles暴发的一次食源性传染病时发现的,是迄今已知毒性最强的物质。它是由肉毒梭状芽孢杆菌(Clostridium botulinum)在厌氧环境中产生的一种神经毒素,主要引起肌肉驰缓、呼吸麻痹为主的中毒症状。百余年来,肉毒毒素中毒事件在全球各地时有发生,不但威胁人类的健康,而且由于其具有极强的神经毒性,有可能被恐怖分子用于恐怖袭击和生物战。因此建立快速、灵敏的肉毒毒素检测方法对保障人类的身体健康和预防恐怖袭击具有重要的现实意义。[目的]建立快速、灵敏的HPLC测定肉毒毒素A的检测方法。[方法]试验以C8反相色谱柱(250×5mm,5μm)为分离柱,以5%乙腈的0.02M磷酸盐缓冲液(pH=7.0)为流动相A、以含60%7,腈的0.02M磷酸盐缓冲液(pH=7.0)为流动相B,以SPD-10A型紫外检测器为检测设备,在柱温为25℃、流速为1mL/min和进样量10μL等色谱条件下对肉毒毒素A进行了10分离和检测。[结果]①检测波长的选择标准溶液用UV-2501型紫外-可见分光光度计进行光谱扫描,其最大吸收波长为278nm,故此选择278nm作为肉毒毒素A的检测波长。②工作曲线的制备肉毒毒素A在50～2000ng范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y(ng)=0.0168X+27.956,相关系数R~2=0.9999。③保留时间的测定肉毒毒素A的保留时间为7.03+0.0094min(n=5),变异系数为0.13%。④重复性试验将浓度为50μg/mL的肉毒毒素A进行测定(n=5),其面积的积分值为28256.60±602.47,变异系数为2.13%。⑤标准回收率试验肉毒毒素A的标准平均回收率为98.17±3.69%,变异系数为3.76%。⑥最低检测限测定肉毒毒素A的最低检测限为30ng。[结论]该方法简单、快速和灵敏度高,可作为肉毒毒素A的一种实验室检测方法加以推广应用。