论文部分内容阅读
目的:通过构建原代大鼠神经细胞混合培养方法,体外评价疫苗的神经毒力作用,寻找神经毒性体外评价生物标志物.方法:摘取1-3日龄SD大鼠大脑组织,无菌条件下获得神经细胞,于DMEM/F12培养基5%CO2培养箱培养7-9天细胞体系稳定.MAP2、GFAP抗体免疫细胞技术鉴定和观察神经元、星形胶质细胞.疫苗体外神经毒力实验共设6个组:空白对照组、非疫苗对照组(β-淀粉酶和长春新碱)、麻疹减毒活疫苗组、腮腺炎减毒活疫苗组、百白破疫苗组.CCK8增殖-毒性实验检测细胞活力,评价疫苗致神经细胞毒性作用的剂量效应关系.免疫荧光标记GFAP、MAP2评价神经细胞形态学改变.ELISA法检测细胞培养上清液中促炎性细胞因子TNFα、IL-1 β、IL-6的表达.