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本实验采用原核表达方式表达CSFV NS5A重组蛋白(rp-NSSA)，以纯化获取的rp—NS5A免疫小鼠制备多克隆抗体。采用PCR方法从携带猪瘟病毒兔化弱毒(Hog CholeraLapinized Virus HCLV)全长基因组cDNA的质粒pPOHCLV中扩增NS5A基因序列，并将其亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)，构建成原核表达载体pETNS5A后在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行优化表达。然后采用Ni+亲和层析方法纯化目的蛋白，将目的蛋白以弗氏佐剂乳化免疫昆明小鼠。SDS-PAGE分析重组蛋白NS5A主要以包含体形式表达，分子大小约60 kDa；ELISA分析表明免疫小鼠血清中含有高滴度抗rp—NSSA抗体；间接免疫荧光(Indi rect Immunofluorescence As say IFA)证实NS5A分布在CSFV感染细胞的细胞浆中。本研究为进一步研究NS5A蛋白生物学功能奠定基础。