【摘 要】
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采集安徽感染PVY的烟草病样,Trizol法提取总RNA,根据PVYHC-Pro基因两侧的保守序列设计特异性引物HC/F1、HC/R1和HC/F、HC/R,RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1,
【机 构】
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安徽农业大学植物保护学院,合肥 230036
【出 处】
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2007年安徽现代农业博士科技论坛
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采集安徽感染PVY的烟草病样,Trizol法提取总RNA,根据PVYHC-Pro基因两侧的保守序列设计特异性引物HC/F1、HC/R1和HC/F、HC/R,RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1,筛选阳性克隆并测序。PVYHC-Pro-4全长1359bp,编码453个氨基酸,与Potato virus Y strain N(AM268435)HC-Pro基因的核苷酸序列相似性最高,达99.0%。构建PVY HC-Pro-4与其他14个PVY HC-Pro基因的系统关系树,可以看出PVYHC-Pro-4与Potato virus Y strain N(AM268435)的亲缘关系最近。HC-Pro的克隆为进一步研究蚜虫传毒机制以及抗病毒基因工程奠定了基础。
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