【摘 要】
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目的：通过对结核杆菌ubiA/Rv3806c基因进行基因重组和临床突变筛选探究ubiA/Rv3806c基因与乙胺丁醇(EMB)耐药的相关性. 材料和方法：构建ubiA/Rv3806过表达结核杆菌菌株,并检
【出 处】
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第一次全国中西医结合检验医学学术会议
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目的：通过对结核杆菌ubiA/Rv3806c基因进行基因重组和临床突变筛选探究ubiA/Rv3806c基因与乙胺丁醇(EMB)耐药的相关性.
材料和方法：构建ubiA/Rv3806过表达结核杆菌菌株,并检测其对EMB的药敏变化;根据结核病诊断细菌学检测标准,在临床结核杆菌耐药菌株库中挑选出无em2bB位点突变的47株EMB耐药株(MIC＞5μg/ml)和8株EMB敏感株(MIC＜5μg/ml)，分别进行ubiA/Rv3806c基因的测序,以了解ubiA/Rv3806c基因突变与EMB耐药的相关性;生物信息学分析所筛得ubiA/R v306突变位点在UbiA膜蛋白上的定位以提示其意义.将所筛得ubiA/Rv3806c-变位点构建到结核杆菌中,并通过药敏实验进一步验证ubiA/Rv3806c对EMB耐药性的影响。
结果：结核杆菌ubiA/Rv3806c基因过表达引起EMB耐药性增加;进一步筛选无embB突变的临床EMB耐药菌株(以EMB浓度=5.0μg/ml定义为EMB耐药的临界点),找到若干集中于UbiA第六个跨膜区域的基因突变位点(密码子第174、175、176位);并验证带有这些突变位点的ubiA/Rv3806c过表达会引起EMB耐药性更高的增加.
结论：研究表明结核杆菌ubiA/Rv3806c基因与EMB耐药相关,并且由于人体中缺乏UbiA同源蛋白,因此UbiA很有潜力作为新药靶标.
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