利用TaqMan荧光探针技术实时定量检测蓝舌病病毒群

来源 :第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuln6
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蓝舌病是一种重要的反刍动物传染病,一旦爆发将对国际贸易和社会经济造成极其严重的损失。本研究建立了一种新型的蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)荧光定量检测技术,可实现对不同血清型BTV NS1基因的快速、可靠检测。利用该技术对随机抽取的8个不同血清型BTV毒株进行检测以验证该方法的有效性;利用所构建的质粒参考品P120(含待检序列)及病毒参考品对该技术进行特异性、敏感性、重复性评价;对模拟血清样品进行检测以验证该方法对样品检测的有效性。结果显示,该技术可有效检出不同血清型BTV毒株;特异性良好,与鹿流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagicdisease virus, EHDV) 1-4型无交叉反应;P120标准品的检测灵敏度为10<3> copies, BTV1的检测灵敏度为1 CCID<,50>;P120、BTV1重复检测CV值均为0;能有效检出不同病毒含量的血清模拟样品。本研究利用TaqMan荧光探针所建立的BTV实时荧光定量PCR检测技术特异性、敏感性、重复性均较好,可作为不同血清型BTV的通用快速检测方法。
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