【摘 要】
：
为构建表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(rHVT-VP2),本研究利用RT-PCR扩增IBDV的VP2基因,构建了重组真核表达质粒pCAGG-VP2,并将携带Pec复合启动子的VP2
【机 构】
：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
论文部分内容阅读
为构建表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(rHVT-VP2),本研究利用RT-PCR扩增IBDV的VP2基因,构建了重组真核表达质粒pCAGG-VP2,并将携带Pec复合启动子的VP2基因表达盒(Pec-VP2-PolyA)进行酶切,连接于Gateway系统入门质粒pENTR构建重组质粒pENTR-VP2.采用GatewayLR克隆技术将pENTR-VP2与构建的重组粘粒pFosC-ccdBK+共同参与基因片段进行互换反应,构建重组粘粒pFosC-VP2.通过将pFosC-VP2与其它4个相互重叠并且覆盖HVT全基因组的粘粒酶切线性化后共同转染CEF细胞,拯救重组病毒rHVT-VP2.将重组病毒在CEF细胞中连续传代20次,利用PCR、western blot和间接免疫荧光进行检测,结果表明VP2蛋白均得到稳定地表达.动物试验结果表明通过一次免疫rHVT-VP2即可诱导针对传染性法氏囊的完全保护力.
其他文献
果园作为一种重要农用型的植被类型，其在我国陆地生态系统碳汇评价中占有重要的地位。本研究以福建省分布面积最大的柑橘果园植被为研究对象，研究了果园植被碳库、碳吸存量及其
建设社会主义新农村的提出标志着我国农村发展将进入一个崭新的阶段。本文论述了开发蚕桑业生态旅游在社会主义新农村建设中的意义,概述了我国生态旅游的发展现状,并对开发以
采用T-RFLP(末端限制性片段长度多态性)技术分析了不同种植茬次白肋烟根际土壤细菌群落功能的动态变化。结果表明:(1)烟草连作后根际土壤细菌群落香脓指数、辛普森指数和丰富
自从1999,就有田间报道PCV2引起的经胎盘感染和繁殖功能障碍.相关几种实验已经得以开展:病毒经子宫接种感染胎儿,口鼻接种感染怀孕的SPF或普通母猪,胎盘内接种SPF母猪.本研究
圆环病毒相关疾病几乎不可能是因为单一病原因子如PCV2引起的.通常是数种病原联合PCV2共同作用摧毁宿主呼吸道防御系统,使之对病原微生物高度易感.PCV2已被证明与猪只呼吸系
PMWS是一种被统称为圆环病毒相关疾病(PCVD)中的一种病症.PMWS主要影响保育及育肥期猪只,体况衰竭是其最主要的代表性疾病临床症状.该病症大多数情况需要PCV2参与并有其它多
彩超的原理,简单来讲就是高清晰度的黑白B超再加上彩色多普勒.对几类超声多普勒进行阐述,对彩超在宠物腹腔器官检查中的应用进行了实验分析.
用人工筛选合成的猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)多肽的葡聚糖偶联物作为包被抗原,以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物,羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜
近年来,在中国很多地区的伪狂犬病Bartha-K61疫苗免疫猪群中接连爆发了新的伪狂犬病疫情.研究表明,现行的Bartha-K61疫苗株不能对当前流行的伪狂犬病病毒变异株(PRV TJ株)提
猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)是一种重要的人兽共患病,可以引起脑膜炎,关节炎等,而其进入大脑引发脑膜炎的两个前提条件是茵血症的产生以及血脑屏障(Bloo