【摘 要】
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目的探讨SOCS1/SOCS3甲基化改变在儿童急性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)Th17/Treg细胞失衡中的作用。方法急性ITP患儿30例,健康同年龄对照组30例。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血
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目的探讨SOCS1/SOCS3甲基化改变在儿童急性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)Th17/Treg细胞失衡中的作用。方法急性ITP患儿30例,健康同年龄对照组30例。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-6蛋白水平;荧光定量PCR检测CD4+T细胞RORyt、FOXP3、SOCS1、SOCS3 mRNA表达;流式细胞术检测外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞、CD4+IL-17A+T细胞比例及CD4+T细胞磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白平均荧光强度(MFI);甲基化特异性定量PCR检测CD4+T细胞SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5+端非翻译区(5’-UTR)3个可能的STAT3结合位点CpG岛甲基化水平。结果 1.与健康对照组比较,急性ITP患儿CD4+IL-17A+T细胞比例及RORyt mRNA表达水平显著上调(P<0.05),CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例及FOXP3 mRNA表达明显降低(P<0.05),Th17/Treg比值明显升高(P<0.05);2.与健康对照组比较,急性ITP患儿IL-6表达水平显著上调(P<0.05),且pSTAT3 MFI值亦明显增高(P<0.05);3.与健康对照组比较,急性ITP患儿CD4+T细胞SOCS1和SOCS3 mRNA水平显著增加(P<0.05),与其Th17/Treg比值呈负相关关系(P<0.05);健康对照组SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5’-UTR区第3个STAT3结合位点的CpG岛完全去甲基化,急性ITP患儿呈低甲基化状态(P<0.05),其去甲基化水平与表达呈正相关关系(P<0.05)。各组SOCS3基因5’-UTR区第1、2个STAT3结合位点CpG岛均处于完全去甲基化状态(P>0.05)。结论 SOCS1和SOCS3基因低甲基化所致IL-6/STAT3信号异常活化可能是急性ITP Th17/Treg细胞失衡的因素之一。
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