【摘 要】
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利用重叠延伸(SOEing)PCR技术,将罗非鱼病源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQ0910株SIP基因与GAPDH基因通过Linker序列融合,构建成为SIP-GAPDH融合基因.经BamH I/SalI双酶切后,定向克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果显示,在37℃,IPTG浓度为0.1mmol/L
【机 构】
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广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东 湛江 524088;广东省水产经济动物病害控制重点实验室,广东 湛江 524088
【出 处】
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2013年环北部湾高校研究生海洋论坛
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利用重叠延伸(SOEing)PCR技术,将罗非鱼病源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQ0910株SIP基因与GAPDH基因通过Linker序列融合,构建成为SIP-GAPDH融合基因.经BamH I/SalI双酶切后,定向克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果显示,在37℃,IPTG浓度为0.1mmol/L,诱导5h时蛋白表达量最大.Western Blot验证了pET-32a-SIP-GAPDH融合基因的蛋白分子量为102.01ku.SIP-GAPDH融合基因的成功构建与原核表达将为研制罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗提供理论依据.
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