【摘 要】
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目的 探讨阿维菌素对S2细胞的容积氯离子通道的作用及肌动蛋白是否在阿维菌素对细胞容积氯离子通道影响过程中起作用.方法 利用膜片钳全细胞记录技术研究阿维菌素是否对低渗诱导的S2细胞的容积氯离子通道电流产生影响,并利用药理学方法进行确认.另外利用Western blotting技术和药理学方法研究肌动蛋白表达变化和阿维菌素对细胞容积氯离子通道的影响之间的关系.结果 低渗刺激后S2细胞的电流值分别从等渗
【机 构】
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中国科学院动物研究所分子毒理学实验室,北京100101
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目的 探讨阿维菌素对S2细胞的容积氯离子通道的作用及肌动蛋白是否在阿维菌素对细胞容积氯离子通道影响过程中起作用.方法 利用膜片钳全细胞记录技术研究阿维菌素是否对低渗诱导的S2细胞的容积氯离子通道电流产生影响,并利用药理学方法进行确认.另外利用Western blotting技术和药理学方法研究肌动蛋白表达变化和阿维菌素对细胞容积氯离子通道的影响之间的关系.结果 低渗刺激后S2细胞的电流值分别从等渗条件下的(125.78±4.36) pA和(-103.47±4.12)pA增加至(1169.86±7.71)pA和(-1082.40±11.08)pA(n=8).另外该膜电流的翻转电位大约是0 mV左右,接近Cl-平衡电位0 mV.提示该电流为氯离子电流.检测不同浓度阿维菌素在低渗条件下是否引起S2细胞的电流的变化,结果发现,阿维菌素0.1,1.0及10μmol·L-1处理组的电流在±40 mV及+100 mV下最大值分别为：926.10±96.73,534.11±46.83,(186.68±22.71) pA及-782.97±49.82,-430.49±66.42,(-206.91 +36.29)pA；与对照组相比具有显著性差异(n=5,P＜0.05).在低渗状态下,给予氯通道阻滞剂尼氟灭酸(NFA)和激活剂戊巴比妥(PBB),在阿维菌素存在的情况下,NFA则基本上完全抑制了氯离子电流,而在阿维菌素抑制容积激活氯离子通道后给予PBB可对氯通道电流有较弱的激活作用.用阿维菌素作用S2细胞后,肌动蛋白表达量明显降低,并呈浓度依赖性.当用氯离子通道激活剂PBB与S2细胞共同作用后,肌动蛋白表达量比阿维菌素单独作用有所增加,而用氯离子通道抑制剂NFA与阿维菌素共同处理后的结果则相反,肌动蛋白表达量下降.结论 S2细胞存在容积氯离子通道型离子通道,并在低渗状态下可引出容积激活氯离子电流,且阿维菌素可作用于容积氯离子通道,并呈剂量依赖性抑制该电流.另外阿维菌素还可使肌动蛋白表达水平下降,这种作用可能通过抑制容积氯离子通道而实现.
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