【摘 要】
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目的 评价蛋白激酶C-α(PKC-α)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对脂多糖诱导的NR8383细胞中线粒体融合蛋白1(Mfn1)的作用.方法 将体外培养的NR8383细胞以1× 104/ml左右的浓度,接种于96孔板中.随机将其分为7组(n=5)：对照组(C组)、LPS内毒素攻击模型组(L组)、模型组+PKC-α抑制剂Go6976组(LG组)、模型组+PKC-α激动剂PMA(LP组)、模型
【机 构】
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天津医科大学南开临床学院天津市南开医院麻醉科
【出 处】
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中国医师协会麻醉学医师分会2017年年会暨2017北京医学会麻醉学专业学术年会
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目的 评价蛋白激酶C-α(PKC-α)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对脂多糖诱导的NR8383细胞中线粒体融合蛋白1(Mfn1)的作用.方法 将体外培养的NR8383细胞以1× 104/ml左右的浓度,接种于96孔板中.随机将其分为7组(n=5)：对照组(C组)、LPS内毒素攻击模型组(L组)、模型组+PKC-α抑制剂Go6976组(LG组)、模型组+PKC-α激动剂PMA(LP组)、模型组+溶媒二甲基亚砜组(LD组)、Go6976组(G组)、PMA组(P组).L组加入10 μ g/ml LPS制备肺泡巨噬细胞内毒素攻击模型,LG组、LP组、LD组分别加入5μMGo6976、100nM PMA、0.1％v/v DMSO预处理30min,再加入10 μ g/ml LPS制备内毒素攻击模型,G组加入PKC-α抑制剂5μM Go6976,P组加入100nM PMA,各组均孵育24h后,检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,应用RT-PCR及Western blot法检测PKC-α、HO-1、线粒体融合蛋白Mfn1表达改变.结果 与C组比较,L组、LG组、LP组、LD组MDA、ROS增高,SOD活性下降,PKC-α、HO-1及其mRNA表达上调,线粒体融合蛋白Mfn1及其mRNA表达下调(P＜0.05),G组、P组各项指标表达差异无统计学意义(P＞0.05).与L组比较,LG组MDA、ROS增高,SOD活性下降,PKC-α、HO-1、线粒体融合蛋白Mfn1及其mRNA表达下调(P＜0.05)；LP组MDA、ROS降低,SOD活性增加,PKC-α、HO-1、线粒体融合蛋白Mfn1及其mRNA表达增加(P＜0.05)；LD组各项指标表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PKC-α/HO-1信号通路激活后可以减轻大鼠肺泡巨噬细胞内毒素攻击模型的氧化应激损伤,其机制可能与该模型中线粒体融合蛋白Mfn1表达增加相关.
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