肝癌细胞蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因(CIP2A)表达水平对凋亡素诱导其凋亡作用机制的研究

来源 :2019中国肿瘤学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:p6688718
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  目的 拟研究肝癌细胞内高水平表达的CIP2A 对由B56d 调节亚基组成的PP2A 全酶的抑制是凋亡素特异性诱导肿瘤细胞凋亡的关键因素之一。方法 构建CIP2A 和Apoptin 真核表达质粒,共转染正常肝脏细胞系,以冈田酸处理细胞,丝/苏氨酸磷酸酶酶活性检测法检测各处理细胞内PP2A 活性,western blot 检测CIP2A 和Apoptin 表达水平,免疫荧光检测Apoptin 在肝脏细胞内的核质分布,流式细胞技术检测各处理组细胞凋亡;采用SiRNA 干扰肝癌HepB3 细胞内CIP2A 表达水平,进而研究CIP2A 表达水平降低后对Apoptin 诱导细胞凋亡的影响;构建真核B56d 调节亚基和Apoptin 表达质粒,共转染HepB3 细胞,丝/苏氨酸磷酸酶酶活性检测法检测各处理组HepB3 细胞内PP2A 活性;western blot 检测HepB3 细胞内B56d 调节亚基表达水平,流式细胞技术检测细胞凋亡。
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