【摘 要】
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目的：Yes 相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)是Hippo 信号通路中关键的转录共激活因子,在许多肿瘤细胞中都被发现高表达,起到癌基因的作用.本文将探讨敲除YAP基因对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响,及其可能机制.材料与方法：构建针对YAP 基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒重组载体,转染口腔鳞癌细胞系CAL27 作为实验组,对照组(Negtive Control
【出 处】
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2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会
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目的：Yes 相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)是Hippo 信号通路中关键的转录共激活因子,在许多肿瘤细胞中都被发现高表达,起到癌基因的作用.本文将探讨敲除YAP基因对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响,及其可能机制.材料与方法：构建针对YAP 基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒重组载体,转染口腔鳞癌细胞系CAL27 作为实验组,对照组(Negtive Control)细胞转染对任何基因均无干扰效应的shRNA 序列.用蛋白印迹法(Western Blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测YAP 基因敲除效果.免疫荧光检测YAP 蛋白表达位置改变.采用CCK-8 细胞增殖实验及EdU 染色法检测敲除YAP 基因对细胞增殖的影响.用流式细胞术检测细胞凋亡及周期分布.通过Western Blot 检测ERK 信号通路、Bcl-2 家族和Caspase 家族等相关蛋白表达水平.同时将细胞接种于裸鼠背部皮下,观察肿瘤形成情况.采用SPSS20.0 软件包对实验数据进行统计学处理.
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