【摘 要】
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本研究探讨了青蛤酶解多肽的制备方法及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性研究.实验选取碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶这5种蛋白酶,以酶解液中
【机 构】
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浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心
【出 处】
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2015中国转化医学大会暨中国转化医学联盟成立大会
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本研究探讨了青蛤酶解多肽的制备方法及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性研究.实验选取碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶这5种蛋白酶,以酶解液中游离的ANN含量为检测指标,筛选出最优酶种并进行正交以获取最佳酶解工艺.通过超滤截留活性最高分子段3 KD以下的酶解液进一步分离纯化,采用MTT法测定所得多肽对DU-145细胞增殖的影响；AO/EB荧光染色法和透射电镜技术观察DU-145细胞的形态学变化；通过JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位；免疫组织化学方法检测nm23H1的表达.实验结果表明,最佳酶种是木瓜蛋白酶,酶解条件是料液比为1∶4,pH值为7.0,加酶量为1500 U/g,温度为45 oC,酶解时间是4h.所得多肽对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用且呈现出时间与剂量依赖性；青蛤多肽作用后细胞出现了凋亡的形态学特征；DU-145细胞的线粒体膜电位显著下降；nm23H1表达增加.因此,青蛤酶解多肽能够明显抑制前列腺癌DU-145细胞增殖,并诱导其发生凋亡发挥作用.
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