灰飞虱从冷冻病叶获得水稻黑条矮缩病毒方法研究

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水稻黑条矮缩病是由水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)引发的一种恶性病毒病,由灰飞虱以持久性不经卵方式传播。近年来随着灰飞虱发生量的日益上升,在江苏省苏北稻区亦开始流行为害,2008年病株率超过1%的发病面积约400万亩左右,给水稻生产带来了严重危害。利用品种抗性被公认为是防治病毒病最为经济有效的方法,而获得携带RBSDV的灰飞虱是开展品种抗性鉴定的前提条件。为此本文对灰飞虱从冷冻保存的病叶中获得RBSDV的方法进行研究。采用RT-PCR及斑点免疫结合法(DIBA)筛选到携带水稻黑条矮缩病毒且不携带水稻条纹病毒(RSV)小麦病株,-70℃冷冻保存45天后,采集叶片以DIBA法筛选到的不携带RSV灰飞虱进行饲毒,发现灰飞虱能从冷冻保存的病叶中获得RBSDV。进一步以上述灰飞虱单虫单苗接种感病品种华粳6号,发现从冷冻病叶上获毒的灰飞虱能够传播RBSDV。这表明灰飞虱能从冷冻病叶中获得RBSDV并传播。这一方法解决了品种抗性鉴定中保持毒源的瓶颈问题,提高接种效率,加快了RBSDV抗病品种的筛选及育种进程,为品种抗RBSDV遗传研究提供了一定依据。
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