母体孕期维生素D缺乏损伤子代雄性小鼠睾丸发育、精子形成和神经发育

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目的探讨母体孕期维生素D缺乏对子代雄性小鼠睾丸发育、精子形成和神经发育的影响。方法 4周龄ICR雌鼠随机分为对照组(n=20)和维生素D缺乏组(n=20)。对照组喂养标准饲料(维生素D3>800IU/kg),VDD组喂养维生素D缺乏饲料(维生素D3<25IU/kg),在交配前喂养四周以后与雄鼠按4:2交配,孕鼠在受孕第18天自然分娩,每窝小鼠随机留取4只雌鼠和4只雄鼠饲养,断乳以后,继续喂以标准饲料和维生素D缺乏饲料。(1)在饲养10周以后,每组剖杀12只雄鼠,称量雄鼠、睾丸和附睾重,检测睾丸中精子数量和活力,检测血清中25-(OH)D和睾酮的水平,检测睾丸中雄激素合成酶蛋白水平,分析睾丸生殖细胞增殖与凋亡水平;(2)余下雄鼠继续饲养至18周,每组随机选取15只雄鼠进行行为学实精小管减少,睾丸雄激素水平和睾酮合成酶水平降低,雄性小鼠生殖能力下降。(2)维生素D缺乏导致子代雄性小鼠快感缺失;旷场实验中潜伏期和穿格数量增加,运动时间和距离增加;高架十字迷验,分别进行糖水偏好实验、黑白巷实验、旷场实验和高架十字迷宫实验,最后进行Morris水迷宫实验,在实验结束时剖杀全部雄鼠,检测血清中25-(OH)D水平。结果(1)在维生素D缺乏饲料喂养组,其子代雄性小鼠血清25-(OH)D水平明显降低,睾丸重量减轻、精子数量减少,睾丸生殖细胞增殖减弱,成熟生宫实验中潜伏期降低、探索时间减少;Morris水迷宫实验中,学习期和记忆期中发现平台潜伏期时间明显延长。结论母体孕期维生素D缺乏以后,导致子代雄性小鼠睾丸发育受损和精子形成减少,降低了雄性小鼠生殖能力;损伤了子代雄性小鼠神经行为发育,增加子代雄性小鼠焦虑抑郁样行为,导致空间识别和学习记忆能力降低。
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