【摘 要】
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从患败血腹水病的日本鳗鲡(Anguilla janponica)中分离出嗜水气单胞菌菌株B18(Aeromonas hydrophila),经福尔马林灭活后注射新西兰兔,制备了高价免疫血清.将菌株B18包被
【机 构】
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集美大学水产学院,农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建 厦门 361021
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从患败血腹水病的日本鳗鲡(Anguilla janponica)中分离出嗜水气单胞菌菌株B18(Aeromonas hydrophila),经福尔马林灭活后注射新西兰兔,制备了高价免疫血清.将菌株B18包被子96孔微孔板上,然后以兔抗血清为一抗,同时利用Eu3+标记试剂标记的羊抗兔抗体为标记二抗(Eu3+-IgG),建立了检测日本鳗鲡嗜水气单胞菌的间接时间分辨荧光免疫检测法(TRFIA).采用棋盘滴定法确定免疫血清和Eu3+-IgG的最适工作浓度分别为1：1200和1：200,通过优化检测条件,病原菌检测灵敏度为1×104 cfu/mL,标准曲线在1.0× 104-1.0×107 cfu/mL范围内线性良好,相关系数达0.99以上,优于荧光抗体法及ELISA法.TRFIA用于水产养殖病原菌的检测在国内外从未见报道,相较于荧光抗体法具有灵敏度高、量程范围宽、能定量检测的优点,本研究提供了一种新的检测思路,有望在水产养殖业得到推广应用.
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