利用DNA免疫制备登革2型病毒NS2B多克隆抗体

来源 :全军免疫学第七届学术交流会暨免疫学新进展主题论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rambo527
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  目的:构建登革2型病毒(DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。意义为研究NS2B在登革病毒感染中的作用提供研究工具。方法:PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果:成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论:本研究通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白,为进一步研究DV感染过程中NS2B的作用奠定了基础。
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